新型農殘速測試劑(二合一)
適用于國家標準方法 GB/T 5009.199-2003
產品參數:
詳細介紹:
【原理及適用范圍】
在一定條件下,有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常情況下,酶催化神經傳導代謝產物(乙酰膽堿)水解,其水解產物與顯色劑反應,產生黃色物質,用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值,計算出抑制率。
本產品適用于蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的快速檢測。
【試劑配制及保存】
膽堿酯酶:使用時取100μL,4℃冰箱保存。
底物顯色劑:使用時取100μL,4℃冰箱保存。
【樣品處理】
整株提取法(適用于韭菜、芹菜等對酶有一些抑制的蔬菜樣品)
選取韭菜、芹菜有代表性的樣品,擦去表面泥土,稱取試樣3 g(精確至0.1 g,請勿剪碎)置于20~50mL大小的瓶子,加入10 mL蒸餾水,輕輕振搖50 次,靜置5min,用濾紙過濾,取上清濾液待測。
整體測定法
選取油菜、菠菜有代表性的樣品,擦去表面泥土,剪成1 cm左右見方碎片,稱取3 g(精確至0.1 g)放入50mL取樣瓶中,加入10 mL蒸餾水,振搖50次,靜置5 min,用濾紙過濾,取上清濾液待測。
【測試】
對照測試:于反應管中加入2.5mL蒸餾水,再加入100μL膽堿酯酶,混勻,放置10 min。加入100μL底物顯色劑,搖勻并立即倒入比色杯中,放入測試通道,按儀器“對照”鍵測試3min的吸光度變化值ΔΑ0 。
樣品測試:于反應管中加入2.5mL待測樣品液,再加入100μL膽堿酯酶,混勻,放置10min后加入100μL底物顯色劑,搖勻并立即倒入比色杯中,放入測試通道,按儀器“樣品”鍵,測試3min的吸光度變化值ΔΑt 。
操作提示:在加底物顯色劑的環節中,可預先將底物顯色劑加入比色杯,待靜置時間一到,馬上將反應管中的反應液倒入已經加有底物顯色劑的比色杯,并迅速放入測試通道進行測試。這樣可以減少同時檢測多個樣品時因加底物時間過長而造成的誤差。
結果判定:
以分光光度計測試時,按以下表達式計算出抑制率:
抑制率(%)=[(ΔΑ0-ΔΑt )/ΔΑ0]×100
以農殘檢測儀檢測時其抑制率一般可自動計算。若樣品抑制率≥50%,表示被測果蔬農殘超標,為陽性結果。陽性結果的樣品需做2次以上重復檢測,多次檢測仍呈陽性需用氣相色譜等儀器做進一步確認。
【注意事項】
酶活性要求:本試劑盒中酶試劑正常活性ΔΑ>0.3。若要求ΔΑ值控制在0.2~0.3之間,可根據ΔΑ測定值自行增減酶量。
保存:試劑盒應保存于4~8℃冰箱,保質期12個月。
使用:任何試劑使用時,用一瓶打開一瓶,用完后才使用新的,防止變質。
器具專用原則:任何用于移液的器具、容器和槍頭都應各自做好標記,單獨使用,以免交叉污染。
試劑只出不入原則:測試時,從任何試劑瓶吸出的試劑,禁止再次注射回試劑瓶。
環境溫度對測試的影響:當環境溫度過低時(一般低于20℃),測試時需作必要保溫措施;產品從冰箱取出后需恢復到室溫才可使用。
常溫方法:本試劑可用常溫方法測試,測試時試劑室溫放置10min,測試1min的吸光度變化值ΔΑ0。正常活性ΔΑ0在0.15~0.3之間。